數(shù)字PCR儀是一種核酸檢測和定量分析的新方法，可以作為傳統(tǒng)實(shí)時(shí)定量PCR的替代方法，以實(shí)現(xiàn)一致定量及稀有等位基因的檢測。數(shù)字PCR的工作原理在于將DNA或cDNA樣品分割為許多單獨(dú)、平行的PCR反應(yīng)，部分這些反應(yīng)包含了靶標(biāo)分子（陽性），而其他不包含（陰性）。單個(gè)分子可以被擴(kuò)增一百萬倍或更多。在擴(kuò)增期間，TaqMan化學(xué)試劑及染料標(biāo)記探針可用于檢測特定序列的靶標(biāo)。當(dāng)不存在任何靶標(biāo)序列時(shí)，沒有信號(hào)累積。PCR分析后，陰性反應(yīng)片段用于生成樣品中靶標(biāo)分子的一致計(jì)數(shù)，而無需標(biāo)準(zhǔn)品或內(nèi)標(biāo)。

　　納流芯片的使用提供了便捷和直觀的機(jī)制來同時(shí)平行運(yùn)行上千個(gè)PCR反應(yīng)。每個(gè)孔都加入了樣品、擴(kuò)增混合物和TaqMan測定試劑的混合物，然后進(jìn)行單獨(dú)分析以檢測存在（陽性）或不存在（陰性）終點(diǎn)信號(hào)?？紤]到孔可能接收到多個(gè)靶標(biāo)序列分子，使用泊松模型應(yīng)用了一個(gè)校正因子。

　　數(shù)字PCR儀和試劑能夠提高現(xiàn)有TaqMan測定的性能，從而實(shí)現(xiàn)更高的靈敏度、精度和一致定量，使應(yīng)用從中獲益。

　　PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。在使用PCR儀的過程中需要注意以下事項(xiàng)：

　　1）環(huán)境要恒定，運(yùn)作環(huán)境的溫度不能過高或過低，在用空調(diào)的房間使用，有些PCR儀有溫度保護(hù)程序，在過低的溫度下機(jī)器不能啟動(dòng)。

　　2）電源要穩(wěn)定，工作的電壓不能波動(dòng)過大，波動(dòng)過大會(huì)造成電子器件損壞，一般建議將PCR儀電源接于穩(wěn)壓電源上。

　　3）盡量不要保存過夜，能經(jīng)常使用就不容易壞。

　　4）數(shù)字PCR儀在使用前要詳細(xì)閱讀使用說明書，遇到不能解決的問題不要隨意拆卸儀表，打電話咨詢廠家或技術(shù)支持部門，通過指導(dǎo)進(jìn)行維修。